电化学 DNA传感器可应用于临床诊断
电化学DNA传感器在细菌及病毒感染类疾病诊断方面具有重要应用。在传统方法中,细菌感染是通过体外血液培养来诊断的,这需要几天甚至几十天的时间,严重延误了疾病治疗,利用DNA传感器可快速检测细菌和病毒。
58彩票Hashimoto等利用光刻微细加工技术刻蚀出0.3 mm的固定DNA探针微金膜电极,研究了测定乙型肝炎病毒的DNA传感器。将电极浸人含DNA 探针和1 molL NaCl的磷酸盐缓冲液(pH7. 0)中,在室温下放置3 h,通过5'-磷酸巯己基的化学吸附作用,探针被固定在金电极上。乙肝病毒DNA靶序列在沸水浴中热变性3 min, 杂交反应在43 C振摇下进行1 h,反应后清洗传感器以除去非特殊键合的DNA。将杂交后的传感器置于100μmol/LHoechst33258溶液中,避光5min,用磷酸盐缓冲液冲洗后,观察Hoechst33258的阳极峰电流。
Wang等利用计时电位测定方法,在碳糊电极上固定了两个长度分别为27碱基和36碱基的DNA探针,此DNA探针与结核杆菌MTB( mycobacterium tuberculosis) 的DR( direct-repeat)区DNA互补,可利用其杂交反应检测MTB含量,选撣的杂交指示剂为Co( phen)33+。
另外,在基因诊断方面,Millan 等利用ssDNA修饰的碳糊电极,在较高离子强度下与靶基因快速杂交( <10 min),用该传感器测定了18个碱基长度的囊性纤维变性基因AF508序列,得到了令人满意的结果。
Wang等报道了与艾滋病人类免疫缺陷病毒I型(HIV- I )相关的短DNA序列测定的传感器。他们将21个碱基和24个碱基与HIV-IU5LTR序列互补的单链寡核苷酸部分修饰在碳糊电极上,以杂交指示剂[ Co( phen);" ]的计时溶出峰来检测杂交。靶基因片段检出限为4x10 -9 mol/L。